ELISA試劑盒方法設計的原理根據是什么？【白細胞介素elisa試劑盒】

發(fā)布時(shí)間：2021/6/15 8:32:47 閱讀次數：1734

ELISA試劑盒在的實(shí)際應用中,通過(guò)不同的設計,具體的方法步驟可有多種.如雙抗體夾心法間接法競爭法雙位點(diǎn)一步法捕獲法測IgM抗體應用親和素和生物素的ELISA.

ELISA試劑盒以免疫學(xué)反應為基礎,將抗原抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù).由于抗原抗體的反應在一種固相載體-聚苯yi烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性.

應用雙抗體夾心法測定標本水平.用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色.

ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色.顏色的深淺和樣品呈正相關(guān).用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值）,通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品的濃度.

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